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聚合物基質(zhì)液相色譜柱的維護(hù)分為哪幾部分

更新時(shí)間:2019-07-10      點(diǎn)擊次數(shù):1137
聚合物基質(zhì)液相色譜柱具有相當(dāng)強(qiáng)的硬度,有無(wú)孔和有孔兩種規(guī)格。該固定相中含有苯基官能團(tuán),可與待測(cè)物發(fā)生疏水相互作用。廣泛用于各種不同基質(zhì)中糖分子、糖醇和其他水溶性物質(zhì)的分離。Carbo-H可以用來(lái)分析有機(jī)酸及利巴韋林等物質(zhì),Carbo-Ca可以用來(lái)分離樹(shù)膠醛糖、阿糖醇等糖類(lèi)。
聚合物基質(zhì)液相色譜柱采用聚合物基質(zhì)填料,色譜柱化學(xué)穩(wěn)定性好,壽命長(zhǎng),分離效果隨時(shí)間變化小。能用堿性溶液進(jìn)行清洗再生。適用于蒸發(fā)光散射檢測(cè)器、電霧化檢測(cè)器以及LC/MS。
 
聚合物基質(zhì)液相色譜柱的維護(hù)分為:色譜柱的平衡、色譜柱的再生、然后才是色譜柱的維護(hù)。下面詳解:
1.色譜柱的平衡
反相色譜柱由工廠(chǎng)測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。新柱應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請(qǐng)一定確保您分析樣品所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。 每天用足夠的時(shí)間以流動(dòng)相來(lái)平衡色譜柱,您就會(huì)在處理問(wèn)題方面獲得大的"補(bǔ)償",而且您的色譜柱的壽命也會(huì)變得更長(zhǎng)。
操作步驟:
a.平衡開(kāi)始時(shí)將流速緩慢地提高,用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(xiàn)(緩沖鹽或離子對(duì)試劑流速如果較低,則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)平衡)
 
b.如果使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過(guò)渡"即每天分析開(kāi)始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動(dòng)相平衡; 分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護(hù)柱子。
 
2.色譜柱的再生
長(zhǎng)期使用的色譜柱,往往柱效會(huì)下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)??梢詫?duì)色譜柱進(jìn)行再生,在有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用一個(gè)廉價(jià)的泵進(jìn)行柱子的再生。
選擇再生方法:
極性固定相的再生:
正庚烷→lv仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水
非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8,CN等)的再生: 水→乙腈→lv仿(或異丙醇)→乙腈→水
 
聚合物基質(zhì)液相色譜柱的維護(hù)
a.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱(硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度)。
b.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過(guò)該色譜柱的pH范圍。
c.避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化。
d.流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過(guò)濾處理。
e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中。
f.氯化物的溶劑對(duì)其有一定的腐蝕性,故使用時(shí)要注意,柱及連接管內(nèi)不能長(zhǎng)時(shí)間存留此類(lèi)溶劑,以避免腐蝕。